牛病毒腹瀉抗體檢測卡用法與判定

　　牛病毒腹瀉抗體檢測卡由預包被牛病毒性腹瀉抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成，應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測牛血清、血漿樣本中牛病毒性腹瀉抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本，經溫育后若樣品中含有病毒性腹瀉抗體，則將與酶標板上抗原結合，經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物，與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物，在孔中加TMB底物液，與酶標結合物反應形成藍色產物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后，產物變為黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有牛病毒性腹瀉抗體。

　　牛病毒腹瀉抗體檢測卡用法與判定：

　　1.1樣本處理

　　1.1.1 血清：在室溫下血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，如保存過程中有沉淀，請再次離心。

　　1.1.2 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA，檸檬酸鈉或者肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，再離心20分鐘（2000-3000轉/分），仔細收集上清，如保存過程中有沉淀，請再次離心。

　　1.2 操作步驟 將密封的檢測卡從鋁箔袋中取出，置于干燥平整的桌面上，用吸管吸取適量血清或血漿，緩慢滴加1滴到加樣孔中（約40μL），再滴入2~3滴樣本處理液（約80μL~120μL)，并開始計時。加樣完成后10～15分鐘觀察結果。